Иммуноглобулины: IgA, IgG, IgM: методы определения, радиоиммунный анализ
Этот высокочувствительный метод разработан в шестидесятые годы 20-го столетия и сначала использовался для определения концентрации инсулина и других гормонов. Сейчас он используется и для определения антигенов и антител. Существует несколько модификаций метода. Одна из них основана на конкурентном связывании меченного радиоактивным изотопом и немеченого антигена с антителами. Суть метода заключается в следующем:
- известное количество антител смешивают с известным количеством меченого антигена и исследуемой пробой (содержащей неизвестное количество антигена).
- антиген, содержащийся в пробе, и стандартные меченые антигены связываются с антителами;
- чем выше содержание немеченого антигена, тем меньше меченого антигена свяжется с антителами ( рис. 20.4 ).
Концентрацию антигена в исследуемой пробе оценивают по уровню радиоактивности иммунных комплексов.
Тот же подход может быть использовани для определения концентрации антител в пробе. В этом случае известное количество антигена смешивается с известным количеством стандартных меченых антител и исследуемой пробой (содержащей неизвестное количество антител).
Основные недостатки метода - необходимость дорогостоящего оборудования и реактивов, а также условий работы с радиоактивными изотопами.
