Метод подсчета микрососудов опухолевой ткани
В большинстве исследований применяется метод подсчета микрососудов в опухолевой ткани, впервые описанный в работе Вейднера и соавт. [ Weidner ea 1991 ]. Выделенные иммуногистохимически микрососуды подсчитываются в областях опухоли, содержащих максимальное количество окрашенных капилляров. При выборе этих "горячих точек" из случайных полей зрения исходят из предположения, что самые ангиогенные опухолевые клоны являются и самыми агрессивными и тем самым определяют биологическое поведение опухоли [ Vermeulen ea 1996 ].
Методологические рекомендации по правильной оценке плотности микрососудов в опухолевой ткани приведены в обзорах [ Gasparini ea 1995 , Vermeulen ea 1996 ]. Следует отметить, что важную роль в проведении анализа играет опытность исследователя [ Barbareschi ea 1995 ]. Возможно, по этой причине не все исследователи согласны, что высокоангиогенные опухоли имеют плохой прогноз [ Hall N.R., ea 1992 , Van ea 1993 , Vesalainen ea 1994 ]. Кроме того, сам подсчет микрососудов в опухоли - очень кропотливый процесс, особенно в высокоангиогенных опухолях, поэтому этот метод недоступен для рутинной диагностической патологической работы.
Попытка облегчить оценку опухолевого ангиогенеза была предпринята Фоке и соавт. [ Fox ea 1995 ]. Meтод подсчета сосудов с помощью точек Чалклей показал в работе [ Fox ea 1995 ] значимую корреляцию с методом, описанным Вейднером. На выбранных "горячих точках" при увеличении 200-250х окуляр, содержащий 25 случайно расположенных точек, располагают так, чтобы максимальное количество точек содержалось внутри области окрашенных сосудов. Вместо отдельных микрососудов подсчитывают количество точек, лежащих вне этой области. Так как нет точного решения, рассматривать ли близко расположенные структуры отдельными сосудами или нет, подсчет с помощью точек Чалклей, по-видимому, более объективен.
Полуавтоматическое подсчитывание признают еще более точным методом оценки внутри-опухолевой плотности сосудов. Основное преимущество применения компьютерной системы анализа изображения - возможность оценки дополнительных морфологических параметров: количества сосудов внутри определенной, заранее заданной площади, площади просвета сосудов, периметра просвета сосудов и процента иммуно-окрашенных областей в поле зрения микроскопа. Автоматический отбор "горячих точек" может решить проблему субъективизма при оценке количества сосудов. Однако попытка выполнить полностью автоматический подсчет микрососудов в опухоли оказалась неудачной [ Fox ea 1995 ].
