Аполипопротеин A-I: количественное определение
В настоящее время основной интерес исследователей сосредоточен на разработке надежных методов количественного определения апо В, апо А-I и ЛП (а). Доводы за и против различных процедур, пригодных для этих целей, будут обсуждаться в соответствующих главах: Радиоиммунологический анализ , Радиальная иммунодиффузия , Иммунонефелометрический анализ , Электроиммунологический анализ , Иммуноферментный анализ ( ИФА ). Очевидно, однако, что все методы имеют ограничения, обусловленные структурой самих липопротеинов.
Так, антигенные детерминанты апо В в составе ЛПОНП экспрессированы гораздо хуже, чем эпитопы того же белка в составе ЛПНП. Поэтому при проведении количественного определения апо В частицы ЛПОНП необходимо предварительно подвергать частичному липолизу или использовать моноклональные антитела, узнающие детерминанты апо В, полностью экспрессированные как в ЛПНП, так и в ЛПОНП.
Все вышесказанное касается, хотя и меньшей степени, метода измерения концентрации апо А-I в ЛПВП, правда, в данном случае проблема разрешается, по-видимому, просто путем частичного делипидирования ЛПВП под действием тетраметилмочевины (ЭММ) или Твина 20.
Описанные проблемы, а также вопросы, связанные с приготовлением стандартов и калибровочных материалов, были рассмотрены недавно в Комитете по изучению липидов и апопротеинов Международного союза иммунологических обществ ( Steinberg K.K. ea, 1983 ; Rosseneu M. ea, 1983 ; Smith S.J. ea, 1987 ).
