Гены IMP-дегидрогеназы
Структурный ген IMP-дегидрогеназы I,кодирующий изоферментI ( ген IMPDH-I ) клонирован и секвенирован из селезенки [ Natsumeda Y.,1990 ].Структурный ген IMP-дегидрогеназы II, кодирующий изофермент II ( ген IMPDH-II ) клонирован и секвенирован из линии клеток, устойчивых к микофеноловой кислоте китайского хомячка и человека [ Collart F.R.,1988 ] и из селезенки человека [ Natsumeda Y.,1990 ].Оба гена не были картированы. Кодирующая нуклеотидная последовательность генов IMPDH-I и IMPDH-II была гомологична на 76,4% ( аминокислотная последовательность кодируемых белков на 84%), но не было гомологии в 3'- в 5'-нетрансляционных областях [ Natsumeda Y.,1990 ]. Оба изофермента, кодируемые двумя генами, содержали 514 аминокислотных остатка. Изофермент II из клеток устойчивых к микофеноловой кислоте хомячка и человека [ Collart F.R.,1988 ] отличался между собой только 8 аминокислотными остатками и был гомологичен изоферменту II мыши [ Tiedeman A.A.,1991 ].
Экспрессия гена IMPDH-II в различных типах лейкозных клеток [ Nagai M.,1991 ] была в 1,5-5,1 раза выше, чем в нормальных лимфоцитах. Увеличение экспрессии м-РНК гена IMPDH-II коррелировало с увеличением активности фермента в опухолевых клетках и с популяцией несозревших клеток. Обработка клеток индуктором дифференциации FORBOL-12-TETRADECANUIL-13-ACETATE в течение 5 дней вызывало уменьшение экспрессии гена IMPDH-II. IMP- дегидрогеназа I является констутивным белком и экспрессия гена, кодирующего этот изофермент постоянна на всех стадиях роста раковых клеток. Количество м-РНК, кодируемая геном IMPDH-II в нормальных лимфоцитах увеличивалось в 3,2 раза фитогемаглютенином [ Masami M.,1992 ]. В покоящихся лейкозных клетках HL-60 человека количество м-РНК гена IMPDH-II увеличивалось в 2,8 раз добавлением сыворотки крови и уменьшалось до 5% от исходного уровня в процессе дифференциации клеток, индуцируемой ретиноевой кислотой , форбол-12-миристат-13-ацетатом или диметилсульфоксидом [ Masami M.,1992 ].
Регуляция экспрессии гена IMPDH-II осуществляется внутриклеточным пулом гуаниновых нуклеотидов. Гуанозин, увеличивая пул, уменьшает количество стационарной м-РНК. С другой стороны, микофенольная кислота- ингибитор фермента - уменьшая пул гуаниновых нуклеотидов, увеличивает количество м-РНК [ Glesne D.A.,1991 ]. Предполагается, что регуляция экспрессии гена осуществляется посттранскрипционно в ядре клетки [ Glesne D.A., 1991 ].
