Гуаниндезаминаза (3.5.4.3) &
EC 3.5.4.3 Рекомендуемое название - гуаниндезаминаза. Другие названия - гуназа, гуанинаминаза, дезаминаза гуанина. Систематическое название - гуанинаминогидролаза. Катализируемая реакция: гуанин+H2O=ксантин+NH3
Гуаниндезаминаза является катаболическим ферментом "сальважного" пути пуриновых нуклеотидов; гуанин может превращаться в ксантин и далее в мочевую кислоту или в присутствии гиплксантинфосфотрансферазы (КФ 2.4.2.8) может быть включен в биосинтез нуклеиновых кислот.
Фермент очищен до гомогенного состояния из цитозольной фракции печени кролика [ Fogel P.J.,1975 ; Bergstrom J.D.,1979 ], печени крысы [ Kimm S.W.,1984 ], печени быка [ Galilea J.N,1981 ; Kim H.K.,1990 ] и печени человека [ Gupta W.K.,1985 ; Kimm S.W.,1987 ; Ito S.,1985 ; Kuzmits R.,1980 ].
Из всех источников фермент являлся лидером с молекулярной массой 100-200 кДа. Молекулярная масса субъединицы фермента 50-59 кДа [ Gupta W.K.,1985 ; Kimm S.W.,1987 ].
Из печени, мозга и эритроцитов крысы, мозга, но не печени мыши [ Sree K.K.,1972 ; Farkas W.R.,1975 ] и из печени человека [ Kuzmits R.,1980 ; Mizobuchi M.,1989 ] выделены две формы гуаниндезаминазы, являющиеся, очевидно, изоферментами и имеющие одинаковую молекулярную массу, но отличающиеся между собой, pH-оптимумом, величинами КМ для субстрата и электрофоретической подвижностью. Для фермента из печени человека величины pI для двух изоферментов гуаниндезаминазы равны 4,7 и 5,5; величины КМ для гуанина 0,56 и 0,26 мкМ и pH-оптимум 7,4 и 9,0, соответственно [ Kuzmits R.,1980 ]. Антитела, полученные к гомогенным препаратам фермента давали только одну полосу преципитации с экстратами печени человека [ Ito S.,1990 ; Ito S.,1989 ].
Гуаниндезамидаза чувствительна к присутствию SH-реагентов [ Gupta W.K.,1989 ] и способна изменять молекулярную массу в зависимости от их присутствия. Так, фермент в цитозоле селезенки, мозга, почек и скелетных мыщц крысы имел молекулярную массу 110 кДа, в цитозоле легких, тонкого кишечника и сердца крысы молекулярная масса фермента 220 кДа, а в цитозоле печени крысы 55 кДа [ Kimm S.W.,1983 ].
Фермент из печени человека катализировал дезаминирование гуанина (КМ=1,53*10-5М при pH 6.0) и 8-аза гуанина (КМ=2*10-4М при pH 6,0) [ Gupta W.K.,1985 ]. В катализе участвуют аминокислотные остатки гистидина и SH-групп [ Kimm S.W.,1987 ]. Из печени быка фермент катализировал дополнительно дезаминирование гуанозина и дезоксигуанозина, а также аденозина и дезоксиаденозина [ Kim H.K.,1990 ]. Ингибиторами фермента являлся 5-аминоимидазол-1-карбоксамид (Ki=5*10-5) [ Gupta W.K.,1985 ] и производные хиноксалина [ Saxena A.K.,1984 ].
Активность гуаниндезаминазы в сыворотке крови человека является индикатором гепатоклеточных повреждений: появление активности фермента в сыворотке крови связано с нарушением функции печени [ Ito S.,1982 ; Mandel E.,1970 ; Knights C.,1965 ]. Этот тест более специфичный, чем принятое в настоящее время определение активности аспартатаминотрансферазы (КФ2.6.1.1) и аланинаминотрансферазы (КФ2.6.1.2) [ Iti S.,1982 ]. Кроме того, переливание донорской крови с повышенной активностью гуаниндезаминазы может вызывать геппатит ы не А и Б-типов [ Ito S.,1986 ]. Этого можно избежать проверкой донорской крови на содержание гуаниндезаминазы и неиспользованием донорской крови с повышенной активностью гуаниндезаминазы [ Ito S.,1986 ; Ito S.,1988 ].
