Рибозофосфат-пирофосфаткиназа (2.7.6.1)
EC 2.7.6.1 .Распространенное название фермента-фосфорибозил пирофосфатсинтетаза. Катализирует реакцию:
RIBOSE-5-PHOSPHATE + ATP = PHOSPHORIBOSILPYROPHOSPHATE + АМP
У человека фермент существует в виде четырех изоферментов, кодирующихся генами рибозофосфат-пирофосфаткиназы.
Фермент имеет олигомерную, склонную к полимеризации структуру.
Фермент из эритроцитов человека состоит, вероятно, из идентичных субъединиц с мол. массой 34,5 кДа. Фермент активен лишь в олигомерной форме из 16 или 32 субъединиц. Смесь мономера с димером, тетрамером и октамером обладала лишь 4% активности вы- сокомолекулярных олигомеров из 16 или 32 субъединиц. Для активности фермента необходимы неорганический ортофосфат Pi и Mg(2+).
Комплекс одного из субстратов фермента из эритроцитов человека с Mg(2+) - ATP-Mg - или же ATP-Mg в присутствии Pi способствует агрегации низкомолекулярных неактивных или же малоактивных олигомеров в ферментативно активные высокомолекулярные олигомеры [ Fox I.H,1971 , Meyer L.J.,1974 ].
2,3-DIPHOSPHOGLYCERATE -аллостерический регулятор переноса О2 гемоглобином - вызывает диссоциацию высокомолекулярных олигомеров фермента до более низкомолекулярных неактивных олигомеров и потому выполняет роль антагониста ассоциирущего фермент комплекса ATP-Mg.
Второй субстрат - D-RIBOSE-5-PHOSPHATE а также AMP, ADP и GTP на агрегацию не влияли [ Fox I.H.,1971 ]. Активация фермента ортофосфатом (Pi) в неочищенных экстрактах клеток или же очищенного фермента в присутствии аллостерических ингибиторов-нуклеотидов кооперативна, кривая зависимости степени активации от концентрации Pi имеет S-образную форму [ Becker M.A.,1979 ].
Изоферменты рибозофосфат-пирофосфаткиназы - продукты генов PRPS1 и PRPS2 ( гены рибофосфат-пирофосфаткиназы ) - чрезвычайно гомологичны: из 317 аминокислотных остатков различались только 13 остатков (т.е. 4%), из которых 7 остатков были родственны, напри- мер, в 5-ом положении в изоферменте PRPS1 содержится изолейцин, а в изоферменте PRPS2 - лейцин.
Изофермент PRPS3 из семенников человека кодиpует аутосомный ген PRPS1L1 имеющий pазмеp 1.4 kb [ Sonoda T.,19 91] . Он состоит из 317 аминокислотных остатков с очень высокой степенью гомологии с изоферментами PRPS1 и PRPS2 крысы: 94,3 и 91,2% соответственно.
Аминокислотная последовательность изофермента PRPS3 из семенников человека отличалась от таковой изофермента PRPS1 крысы всего лишь 18 аминокислотными остатками, 3 из которых родственны.
