AICART-IMPC Фермент
Бифункциональный фермент кодирует один структурный ген OPAIFT , местом локализации которого является 2-я хромосома .
Бифункциональный фермент найден у некоторых бактерий [Aiba A.,1989; Flannigan K.A.,1990 ], у птиц [ Mueller W.T.,1981 ], у млеко- питающих, в том числе у человека [ Jones C.,1986 ; Yamaguchi M., 1989 ].
Бифункциональный фермент получен в гомогенном состоянии из цитозоля клеток печени цыпленка [ Mueller W.T.,1981 ; Benkovic S.J.,1984 ]. Нативный димерный фермент имел мол. массу 125-135 кДа и состоял из идентичных субъединиц с мол. массой 67-71 кДа [ Benkovic S.J.,1984 ; Caperelli C.K.,1980 ].
Отношение активности IMP-циклогидролазы к активности аминоимида- золкарбоксамидрибонуклеотидтрансформилазы на последних стадиях очистки и для гомогенного фермента составляло 6:1 [ Mueller W.T.,1981 ]. Фер- мент из асцитных клеток рака Эрлиха человека [ Geiger H.,1975 ] имел мол.массу 350 кДа и состоял из 8 идентичных субъединиц с мол. массой 46 кДа. Каждая из этих субъединиц в свою очередь состояла из двух различных полипептидов с мол. массами 28,5 и 18 кДа. Возможно, что ге- теромерное строение субъединицы обусловлено ее протеолитическим расще- плением в процессе выделения и очистки фермента или же в процессе оп- ределения гомогенности и мол. массы субъединицы методом дискэлектрофо- реза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата-Nа. Во вся- ком случае, при этих процедурах авторы не использовали ингибиторы про- теолитических ферментов, например, фенилметилсульфонилфторид.
Общепризнано [ Benkovic S.J.,1984 ], что для аминоимдазолкарбокс- амидрибонуклеотидтрансформилазы донором формильной группы служит при- родный (6R)-10-формилтетрагидрофолат .(6S)-Формилтетрагидрофолат этим ферментом в качестве субстрата не используется и не ингибирует его. Перенос 10-формильной группы от 10-формилтетрагидрофолата на акцептор, как и в глицинамидрибонуклеотидтрансформилазе , осуществляется без промежуточного образования формилированного производного фермента [ Smith G.K.,1982 ] и без гидролиза имидазольного кольца [ Mueller W.T.,1981 ], как это предполагалось ранее [ Baggott J.E.,1979 ].
Вопрос о существовании общего для обеих трансформилаз подцентра трансформилирования [ Bencovic S.J.,1984 ] остается открытым.
Аминоимидазолкарбоксамидрибонуклеотидтрансформилазная активность этого бифункционального фермента рассматривается как мишень для противораковой активности ряда производных фолевой кислоты, например, таких к а к полиглутамат метотраксата [ Morrison P.F.,1989 ] - см. Ферменты биосинтеза пуриновых нуклеотидов как мишени действия противораковых препаратов .
Структурный ген бифункционального фермента - ген OPAIFT или alu у человека локализован во 2-ой хромосоме [ Jones C.,1986 ; Yamaguchi M.,1989 ;]. Он не был точно картирован, а также не был секвенирован. Использование для клонирования гена (локуса 2-ой хромосомы) из раковых клеток человека линии HeLa культивируемых in vitro мутантных ауксотрофных по аденину штаммов клеток линии FМЗА мыши показало [ Yamaguchi M.,1989 ; Yamaguchi M.,1989 ], что локус 2-ой хромосомы действительно содержит лишь один структурный ген, т.е. что продукт этого гена alu является бифункциональным ферментом.
