Транспорт белков везикулярный в бесклеточной системе
Реконструкцию везикулярного транспорта в бесклеточной системе впервые удалось получить для стопки Гольджи . Когда выделенные стопки Гольджи инкубировали с цитозолем и ATP, от их краев отшнуровывались неклатриновые окаймленные пузырьки , которые, по-видимому, переносили белки между цистернами. Прослеживая последовательный процессинг олигосахаридов на гликопротеинах по мере их продвижения из одного компартмента Гольджи к другому, стало возможным реконструировать in vitro процесс везикулярного транспорта ( рис. 8-76 ). Было обнаружено, что отпочкование неклатриновых окаймленных пузырьков в такой бесклеточной системе требует наличия смеси белков из цитозоля и АТР, из чего следует, что это активный процесс, а не простая самосборка. Необходимые для транспорта компаненты эволюционно крайне консервативны, так как в экспериментах по реконструкции цитозоль животной клетки можно с успехом заменить цитозолем дрожжей или растений. Таким образом, для идентификации молекул, участвующих в везикулярном транспорте, можно сочетать генетический подход, используемый для клеток дрожжей, и бесклеточные системы млекопитающих.
