PKC (протеинкиназа C): блокирование входа ионов кальция в клетки
Так как активаторы аденилатциклазы простагландин Е1 и простациклин подавляют Са-зависимые реакции тромбоцитов путем ингибирования подъема Ca, вызванного индукторами агрегации (тромбином и другими) ( Yamanishi et al., 1983 ; Zavoico and Feistein, 1984 ), логично было предположить, что усиление Са-зависимых реакций под действием протеинкиназы С может быть обусловлено, хотя бы отчасти, потенциированием рецепторзависимого увеличения Ca.
Однако при изучении влияния форболмиристатацетата на индуцированный агонистами подъем Ca в тромбоцитах было обнаружено, что он вызывает подавление подъема концентрации кальция.( Авдонин, Алтухова, 1985 ). Как показано на рис.77 , ФМА , начиная с концентрации 10##М, подавляет повышение Ca, вызванное АДФ , тромбином , вазопрессином и аналогом простагландиновой эндоперекиси U46619 .
При 10-8#М ФМА полностью устранял рецепторзависимый подъем Ca в ответ на все индукторы, кроме тромбина. В случае тромбина сохранялось около 20% от максимального прироста Ca. Полумаксимальное ингибирование кальциевых ответов тромбоцитов происходило при концентрации форболового эфира около 0,5 нМ. В этих же концентрациях форболмиристатацетат активирует протеинкиназу С. Аналогичные данные были получены Макинтайром и др., показавшими, что форболмиристатацетат в тромбоцитах ингибирует повышение Ca и активацию фосфоинозитидного обмена , вызванные вазопрессином. Впоследствии блокирование протеинкиназой С рецепторзависимого подъема Ca и фосфоинозитидного обмена было продемонстрировано на многих типах клеток (см. обзор Houslay, 1991 ).
Данные ( Авдонин, Алтухова, 1985 ) однозначно показывают, что подавление рецепторзависимого увеличения Ca в первую очередь обусловлено инактивацией механизма его входа, т.е. рецепторуправляемых каналов.
Открывание рецепторуправляемых каналов в тромбоцитах происходит в несколько стадий, включающих связывание гормона с рецептором, активацию G-белка действующего на канал либо непосредственно, либо через фосфолипазу С и продукт катализируемый этим ферментом реакции инозитол-1,4,5-трисфосфат . Теоретически блокирование может происходить на любом из этапов передачи гормонального сигнала, так как протеинкиназа С может фосфорилировать рецептор, G-белок , сам канал либо какой-нибудь другой компонент, участвующий в сопряжении этих белков.
