Миозин: ЭДТА-АТРазная реакция
ЭДТА-АТРазная реакция миозина, активируемая одновалентными катионами, протекает по схеме:
М + АТР = М*АТР+ М + АДР + Р , где М - активный центр миозина, HMM или S1, а Р - неорганический фосфат.
Совершенно иначе протекает Mg++ - АТРазная (а также Са++ - АТРазная) реакция миозина, механизм которой включает изменения не только субстрата, но и белка:
М + АТР = М*АТР + М'*АТР + М''*АДР*Р
М'*АДР*Р= М'*АДР + Р = М*АДР + М + АДР , где М' и М'' - изомерные формы белка с увеличенной триптофановой флуоресценцией. Главной особенностью этой реакции является длительное существование промежуточного комплекса М''*АДР*Р, который подвергается медленной изомеризации (k+4 = 0,06 /с).
Искуственным стабильным аналогом такого промежуточного комплекса АТРазной реакции является комплекс миозина или S1 c АДР и анионом ванадата V (аналогом Р). В комплексе S1-АДР-V молекула S1 имеет иную конформацию и доменную структуру, чем в отсутствие нуклеотидов или в комплексе S1-АДР. Таким образом, в процессе Mg++ - АТРазной реакции миозиновая головка подвергается глобальной конформационной перестройке, сопровождающейся полным изменением доменной структуры.
