Фосфатаза 5
Этот фермент впервые был обнаружен в мембранах эритроцитов. Впоследствии было показано, что 5-фосфатаза представлена целым семейством мембраносвязанных и растворимых изоформ( Shears, 1989 ; Hansen et al., 1987 ). Рассмотрим свойства одной из этих изоформ, растворимой 5-фосфатазы из цитозоля тромбоцитов , которая была охарактеризована Коннолли и соавт ( Connolly et al., 1985 ). По данным электрофореза в додецилсульфате натрия тромбоцитарная форма 5-фосфатазы имеет молекулярную массу 45 кДа.
Этот фермент отщепляет фосфатную группу в положении 5 у трех субстратов - Ин-1,4.5-Ф3# , Ин-1,3,4,5-Ф4# и Ин-ц1:2,4,5-Ф3# . Его сродство по отношению инозитолтетракисфосфату (Кm# 1 мкМ) на порядок выше, чем к Ин-1,4,5-Ф3# (Кm# 10 мкМ), поэтому при сопоставимых концентрациях субстратов он гидролизует преимущественно Ин-1,3,4,5-Ф4# . Для различных форм 5-фосфатазы, выделенных из других клеток, также характерно более высокое сродство к инозитолтетракисфосфату ( Shears, 1989 ). С другой стороны, максимальная скорость (Vmax#) гидролиза Ин-1,4,5-Ф3# в 3 раза выше, чем скорость гидролиза Ин-1,3,4,5-Ф4#. Расщепление 5-фосфатазой своего третьего субстрата, циклического ИнФ3# , идет значительно медленнее вследствие того, что Vmax# этой реакции на порядок ниже, чем при гидролизе двух первыз субстратов, а Кm# составляет около 150 мкМ. По всей вероятности, именно благодаря таким кинетическим параметрам 5-фосфатазы в стимулированных тромбином тромбоцитах происходит существенное накопление Инц1:2,4,5-Ф3# - до одной трети от Ин-1,4,5-Ф3# ( Ishii et al., 1986 ).
Продукт 5-фосфатазной реакции Ин-1,4-Ф2# распадается практически полностью по пути образования Ин-4-Ф ( Inhorm et al., 1987 ; Morgan et al., 1987 ; Dillon et al., 1987 ). Гидролиз Ин-1,4-Ф2# осуществляет 1-фосфатаза . Заметное расщепление Ин-1,4-Ф2# 4-фосфатазой происходило только в том случае, когда его концентрация была очень высока и составляла 10-4#-10-5# М ( Hughes, Putney, Jr., 1989 ; Ackermann et al., 1987 ).
