Таргетинг генов тканеспецифический (ген инсулинового рецептора)
Суть технологии схематически можно представить следующим образом. Природный ген инсулинового рецептора в эмбриональных стволовых клетках мыши заменялся искусственным геном, в котором в области первых трех экзонов вводились сайты LoxP (Locus of crossingover). Эти сайты содержат последовательности из 32 пар нуклеотидов ДНК, которые присутствуют в геноме бактерий и участвуют в кроссинговере бактериальных хромосом. Кроссинговер у бактерий контролируется ферментом cre (cre-recombinase). Поэтому у другой группы животных в геном встраивали ген cre под промотором гена специфической протеинкиназы, который экспрессируется только в мышцах.
Затем проводили скрещивание двух линий мышей, из которых одна содержала в геноме LoxP, а другая cre и в потомстве отбирали мышей, которые содержали оба гена. что вызывало у части животных нокаутирование гена инсулинового рецептора только в мышцах, вследствие происходящего кроссинговера. Они были названы чудесными мышами (miracle mice).
