Пролактин гипофиза ягненка и овцы: мРНК
Секвенированная кДНК пролактина из гипофиза ягненка состоит из 25 п.о. 5'-нетранслируемой, 149 п.о. 3'-нетранслируемой и 690 п.о. кодирующей области, включая терминирующий триплет ( Adams T.E. ea, 1989 ).
Расшифрованная мРНК пролактина ягненка определяет аминокислотную последовательность препролактина, которая содержит 30 а.к. остатков сигнального пептида и пролактин размером 199 аминокислотных остатков ( Adams T.E. ea, 1989 ). Выведенная из нуклеотидной последовательности мРНК пролактина первичная структура зрелого гормона отличается в позиции +10 от известной, полученной из данных секвенирования аминокислотной последовательности белка. В этом положении пролактина вместо ранее известной аспарагиновой кислоты Asp-10 стоит аспарагин Asn-10 ( Adams T.E. ea, 1989 ). Это отличие, отмечают авторы ( Adams T.E. ea, 1989 ), может отражать полиморфизм между различными популяциями овец. Определенная авторами ( Adams T.E. ea, 1989 ) гомология с мРНК пролактина быка составила 97.5%.
Секвенированная другой группой исследователей кДНК пролактина из гипофиза овцы состоит из 60 п.о. 5'-нетранслируемой, 143 п.о. 3'- нетранслируемой и 723 п.о. кодирующей области, включая терминирующий триплет ( Varma S. ea, 1989 ). В 5'-области мРНК присутствует два возможных кодона ATG старта трансляции. По мнению авторов ( Varma S. ea, 1989 ) более ранний из них предпочтителен, так как его нуклеотидное окружение 5'- TCC(ATG)G-3' очень похоже на известный оптимальный контекст последовательности 5'-ACCATGG-3'для инициации трансляции эукариотическими рибосомами ( Varma S. ea, 1989 ). 3'-нетранслируемая область мРНК содержит сигнал полиаденилирования AATAAA, расположенный в 28 нуклеотидах от 3' конца.
Открытая рамка считывания мРНК пролактина овцы определяет аминокислотную последовательность препролактина, в котором самый длинный из известных для пролактина сигнальный пептид состоит из 41 а.к.остатка ( Varma S. ea, 1989 ), что на 11 а.к.остатков больше, чем у ягненка ( Adams T.E. ea, 1989 ), а пролактин имеет тот же размер -199 аминокислотных остатков ( Varma S. ea, 1989 ).
Анализом аминокислотной последовательности препролактина овцы показано наличие в сигнальном пептиде лейцин богатого гидрофобного района (-7/-18), важного для транслокации секреторных белков, и определен сайт отщепления сигнального пептида ( Varma S. ea, 1989 ). Потенциальный сайт гликозилирования пролактина овцы определен как Asn-31 ( Varma S. ea, 1989 ). В отличие от авторов нуклеотидной последовательности мРНК пролактина ягненка ( Adams T.E. ea, 1989 ) определенная Varma S. и сотрудниками ( Varma S. ea, 1989 ) мРНК кодирует пролактин, идентичный известному, последовательность которого получена из данных секвенирования аминокислотной последовательности белка. Определенная авторами ( Varma S. ea, 1989 ) гомология с мРНК пролактина быка составила 90%.