Ген Пролактин крысы: регуляторные участки промотора
Экспрессия гена пролактина крысы регулируется множеством различных полипептидов и стероидных гормонов, которые действуют через два индивидуальных регуляторных района, разделенных примерно 1.5 тысячами нуклеотидов. Стероидный гормон эстроген (E) индуцирует транскрипцию гена пролактина крысы связываясь с эстрогеновым рецептором ( ER ), который, в свою очередь, связывается с эстроген ответственным элементом ( ERE ).
ERE находится на 3' конце дистального (удаленного) энхансерного района, между позициями -1550 и -1578 последовательности гена ( Maurer R.A. ea, 1987 ). Каким образом ER комплекс взаимодействует с РНК полимеразой II, находящейся на удалении в 1500 нуклеотидов от промотора, точно неизвестно. Однако имеются данные, показывающие, что хроматин 5'-регуляторного района гена пролактина крысы может образовывать петлю , структура которой при этом стабилизируется эстрогеном связанным с ER-рецептором ( Cullen K.E. ea, 1993 ).
Таким образом, удаленные друг от друга комплексы <эстроген ="рис.4 ).
Присутствие или отсутствие регуляторных транс - действующих факторов, которые связываются с регуляторными элементами внутри гена, важно для его экспрессии. Секвенированием области -3475 п.о. гена пролактина человека был выявлен элемент, похожий на удаленный (дистальный) энхансер гена пролактина крысы, который содержит сайты связывания для гипофизспецифичного транскрипционного фактора Pit-1 ( Davis J.R.E., 1990 ; Berwaer M. ea, 1991 ). Исследование активности слитых генных конструкций репортерного гена и дистального энхансера гена пролактина крысы показало, что для обеспечения чувствительности энхансера к воздействию эстрогена необходимо наличие как Pit-1, так и рецептора ER. Однако в клетках плаценты не обнаруживается мРНК транскрипционного фактора Pit-1. Вместо него присутствует другой фактор этого же семейства - Oct-1 ( DiMattia G.E. ea, 1990 ). Таким образом, отсутствие Pit-1 также может являться причиной минимального влияния эстрогена на экспрессию гена пролактина в плаценте ( Brown N.A. ea, 1994 ).
Энхансер гена пролактина быка был определен в 5'-фланкирующем районе между позициями нуклеотидной последовательности гена -1124 и -985. С использованием химерных конструкций с репортерным геном было показано, что последовательность -1124/-985 функционирует независимо от ориентации и является необходимой и достаточной для проявления энхансерной активности ( Wolf J.B. ea, 1990 ). Показано высокое сходство района данного энхансерного элемента с энхансерным элементом гена пролактина крысы, локализованным в 1500 нуклеотидах от старта транскрипции ( Wolf J.B. ea, 1990 ). Причем промоторные последовательности быка и крысы также высокогомологичны, а клетки крысы оказались способными регулировать экспрессию с промотора гена пролактина быка. Это означает, что трансдействующие факторы, которые связываются с ДНК, очень похожи в обоих видах, а сродство к ДНК и относительное количество этих белков в клетке различно ( Wolf J.B. ea, 1990 ).
