Эмбриональные стволовые (ЭС) клетки мышей
Мышиные ЭС клетки впервые были выделены в 1981 г. с использованием технологий, основанных на опыте работы с культурой клеток ЭК ( Evans и Kaufman, 1981 ; Martin, 1981 ). ЭС клетки получены из пре-имплантационного бластоциста, полой сферы клеток, содержащих внешний слой трофобластов , дающих начало клеткам плаценты, и внутреннюю клеточную массу (ВКМ) , из которой получают ЭС клетки. Клетки ВКМ в конечном счете образуют эмбрион и, следовательно, обладают способностью образовывать все ткани тела. Хотя эти действительно плюрипотентные клетки в эмбрионе in vivo являются короткоживущими, в культуре их можно поддерживать сколь угодно долго в присутствии лейкемийного ингибиторного фактора ( LIF ) и/или на фидерном слое мышиных эмбриональных фибробластов (МЭФ) ( Smith и др., 1988 ; Williams и др., 1988 ). Мышиные ЭС клетки оказали огромное влияние на многие области исследования за последние более чем 20 лет. В частности, ЭС клетки могут быть использованы для воссоздания мышиных эмбрионов на ранних стадиях развития ( Bradley и др., 1984 ), и это сформировало основу технологии геномных манипуляций, породивших сотни "нокаутных" трансгенных животных для исследований экспрессии генов и их регуляции in vivo ( Thomas и Capecchi, 1987 ). ЭС клетки позволяют также исследовать ранние стадии развития млекопитающих in vitro, что снимает необходимость сбора периимплантационных эмбрионов и продолжают использовться для анализа основных механизмов, лежащих в основе плюрипотентности и клеточной специализации.
