G-CSFR (Г-КСФР) рецептор: участки связывания Г-КСФ
Кристаллографические данные по третичной структуре Г-КСФР и его комплекса с Г-КСФ до сих пор не получены из-за больших размеров и гликозилирования рецептора, поэтому предприняты попытки исследования механизма их взаимодействия другими методами. Применение теоретических подходов позволило предсказать, что консервативный CRH-модуль цитокиновых рецепторов (200 АКО) участвует в связывании лиганда, a BN- и ВС-домены состоят из семи (бета-тяжей, формирующих по две бета-складки [ Bazan ea 1990 ]. Эта модель была подтверждена после определения кристаллических структур рецепторов гормона роста [ De ea 1992 ] и эритропоэтина [ Livnah ea 1996 ]. При использовании метода делеционного анализа кДНК Г-КСФР [ Fukunaga ea 1991 ] и картирования- с помощью моАТ [ Layton ea 1997 ] установлено, что CRH-модуль Г-КСФР является главным в связывании с Г-КСФ и активации комплекса in vivo. Остатки Cys и последовательность WSXWS требуются для поддержания структуры CRH-модуля, а не для связывания с Г-КСФ [ Anaguchi ea 1995 , Fukunaga ea 1991 , Horan ea 1997 ].
Физико-химическими методами обнаружено, что Г-КСФР и различные составляющие его внеклеточной области формируют комплексы рецептор-лиганд со стехиометрией 1:1, 2:1, 2:2 и 4:4 в зависимости от экспериментальных условий [ Fukunaga ea 1990 , Hiraoka ea 1995 , Hiraoka ea 1994a , Horan ea 1997 , Horan ea 1996 , Li ea 1997 ]. Установлено также, что для высокоаффинного связывания с Г-КСФ и олигомеризации Г-КСФР требуется не только CRH-модуль, но и Ig-домен [ Hiraoka ea 1995 , Hiraoka ea 1994 ], причем процесс сопровождается конформационными изменениями как в рецепторе, так и в лиганде [ Horan ea 1997 , Horan ea 1996 , Li ea 1997 ].
