Поли(A)-полимераза животных
Поли(A)-полимераза животных состоит из двух субъединиц с молекулярными массами около 80 и около 43 кДа, которые образуются в результате альтернативного сплайсинга их общей пре-мРНК. Короткий полипептид не обладает ферментативной активностью, и его функции неизвестны. Большая полипептидная цепь содержит С-концевой домен, обогащенный Ser и Thr и не определяющий ни одну из функций фермента, обнаруживаемых in vitro. Предполагают, что регуляторную роль играет множественное фосфорилирование этого домена. С- Концевой домен также содержит один из двух сигнальных последовательностей, необходимых для транспорта фермента в ядро. Вторая сигнальная аминокислотная последовательность локализована на границе С-концевого домена и основного полипептида поли(A)- полимеразы.
Сравнительное исследование первичной структуры поли(А)- полимеразы показало наличие в ее полипептидной цепи каталитического домена, характерного для полимераз семейства X , к которому относятся ДНК-полимераза бета , терминальная трансфераза , а также некоторые другие нуклеотидилтрансферазы. Используя 3'-конец расщепленной РНК в качестве затравки, поли(А)-полимераза последовательно присоединяет к нему остатки AMP из ATP по тому же самому механизму, что и другие ДНК- и РНК-полимеразы.
Для эффективного функционирования поли(A)-полимераза требует наличия фактора CPSF , а также поли(A)-связывающего белка PAB II (poly(A)-binding protein II) , который связывает полиаденилирующий комплекс с РНК после присоединения к ней, по крайней мере, десяти остатков А. В присутствии этих двух факторов поли(А)-полимераза сразу синтезирует поли(А)-последовательность полной длины по процессивному механизму. Гипотетическая структура элонгирующего комплекса представлена на рис. I.14 .
