Исследование химических модификаций микроцина B
Вещества разводились в 50% MeCN/0.1% ТФУ до концентрации 100 мкМ и смешивались с 10 мМ пропионовым ангидридом или NHS-биотином в 0.1 М ацетатном буфере (pH 4) или 0.1 М фосфатном буфере (pH 7.4) и инкубировались при 37*С ночь (реакции при pH 4) или 1 час при 50*С (реакции при pH 7.4). Для проведения мягкого щелочного гидролиза, к реакциям добавлялось пол-объема 20%-го водного раствора NH3 и инкубация продолжалась еще 30 мин при 50*С. Реакции останавливали добавлением ледяной уксусной кислоты и обессоливали с помощью С18-микроколонок (ZipTip C18, Millipore) перед масс-спектрометрией.
