Лигирование продукта амплификации в плазмидный вектор (микроцин B)
Использовали следующую реакционную смесь (объем реакции 10-15 мкл):
Т4 ДНК лигаза - 5 ед. акт.
буфер Т4 ДНК лигазы 10х - x1
плазмидная ДНК - 15-25 нг
фрагмент ДНК - количество лигируемого фрагмента ДНК подбиралось таким образом, чтобы обеспечить молярное соотношение плазмиды к фрагменту в среднем 1:10.
mQ - до нужного объема
Реакцию проводили в течении ночи при +16*С.
