Трансформация замороженных компетентных клеток E. coli
200 мкл замороженной суспензии клеток E.coli штамм DH5альфа размораживали на льду 30 минут. Добавляли ДНК (5 мкл лигазной смеси). Инкубировали на льду 30 минут для сорбции плазмидной ДНК. Затем выдерживали клетки при 42*С 30 секунд (heat shock) и сразу охлаждали во льду в течении 5 минут. Добавляли 800 мкл SOC и инкубировали при 37*С 60 минут. На чашки Петри с твердой агаризованной средой, содержащей ампициллин в концентрации 100 мкг/мл, засевали по 50, 100 и 200 мкл суспензии. Для проведения бело-голубой селекции (использовалась при работе с вектором pAL-TA) перед посевом в чашку втирали 10 мкл 1 М IPTG и 20 мкл X-Gal (20 мг/мл). Чашки Петри помещали в термостат на 37*С на ночь.
