Микроорганизмы: чувствительность возбудителя к антибиотикам
Определение чувствительности возбудителя к антибиотикам.
Одна из главных обязанностей лабораторий клинической микробиологии - определение чувствительности выделенных штаммов бактерий к антибиотикам. Для этого существуют как качественные, так и количественные методы.
Качественные методы позволяют отнести возбудителя к одной из трех категорий микроорганизмов: чувствительным, умеренно устойчивым или устойчивым. Обычно используют метод диффузии в агаре в модификации Кирби-Бауэра : пропитанные антибиотиками бумажные диски укладывают на поверхность плотной питательной среды, засеянной исследуемым штаммом, и через 18-20 ч измеряют диаметры зон задержки роста вокруг дисков.
Другой способ - посев исследуемой бактериальной культуры в пробирки с жидкими питательными средами, в каждую из которых добавлен какой-либо антибиотик в определенной концентрации.
Качественные методы должны быть тщательно выверены с помощью количественных.
Для количественного определения используют метод последовательных разведении. Взвесь бактерий высевают на жидкие или плотные питательные среды, содержащие возрастающие концентрации антибиотика. О чувствительности бактерий судят по минимальной концентрации антибиотика, подавляющей их рост, - МПК . Содержимое пробирок (чашек Петри), в которых бактериального роста не было, пересевают на свежие питательные среды. Концентрация антибиотика в пробирке (чашке Петри), из которой получить субкультуру не удалось, является минимальной бактерицидной - МБК .
Широко распространен автоматизированный микровариант этого метода, в котором вместо пробирок или чашек Петри используются планшеты с лунками.
Появился более удобный вариант метода диффузии в агаре - так называемый Е-тест . Вместо бумажных дисков в нем используют градуированные полоски, на которых создан градиент концентрации антибиотика. Полоски укладывают на поверхность плотной питательной среды, засеянной исследуемым штаммом; после инкубации образуется овальная зона подавления роста. В месте пересечения этой зоны с полоской считывают значение МПК .
