Определение скорости включения радиоактивных меток
Определение скорости включения радиоактивномеченных тимидина и лейцина.
Для описанного в предыдущем разделе выделения РНК снег растапливали при температуре +4*C в течение суток. Теоретически такая обработка могла приводить к активации бактерий, которые неактивны на снегу при отрицательных температурах, но способны возобновлять жизнедеятельность при температуре около 0*C. Чтобы убедиться, что активные бактерии присутствуют в антарктическом снеге in situ, мы провели опыт по включению [метил-3H]тимидина и [3H]лейцина ( Табл. 7 ). Тимидин включается в состав вновь синтезированных цепей ДНК, а лейцин - в состав белков.
Включение радиоактивных изотопов варьировало в пределах 4,4-158,1 пмоль/чхл для тимидина, и в пределах 20,8-365,9 пмоль/чхл для лейцина. Уровень включения радиоактивных изотопов, на станции Мирный, сопоставим с таковым для образцов снега на поверхности льда высокогорного озера в Пиренеях и льда высокогорного озера в Альпах (25 пмоль/лхчас тимидина, 226 пмоль/лхчас лейцина [ 162 ]). На станциях Дружная, Ленинградская и Прогресс скорость включения радиоактивно меченых изотопов была в 20-30 раз ниже чем на станции Мирный. Минимальный уровень активности наблюдался на станции Ленинградская, которая среди четырех рассматриваемых станций имеет самую низкую среднегодовую температуру и самую большую скорость ветров. Однако, даже уровень включения на Ленинградской существенно превышал значения, полученные с образцами снега, отобранного на куполе Антарктиды (0,13 пмоль/лхч для тимидина и 0,31 пмоль/лхч для лейцина). Таким образом, нам удалось показать присутствие активных бактерий на поверхности антарктического снега in situ.
