a-Кетоглутаратдегидрогеназа (КГД) из дрожжей S. cerevisiae
Комплекс а-КГД из пекарских дрожжей был выделен, очищен примерно в 100 раз и охарактеризован [ Hirabayashi ea 1971 ]. Показана абсолютная зависимость активности а- КГДК от СоА и NAD+ , оптический спектр энзима оказался характерным для флавинов , в качестве кофактора был идентифицирован FAD . Из дрожжей S. cerevisiae выделен мутант, лишенный а-КГД-ной активности. Мутант был неспособен расти на среде с несбраживаемыми источниками углерода. Митохондрии, выделенные из мутанта, окисляли все субстраты цикла Кребса, NADH, лактат, кроме а-кетоглутарата [ Subik ea 1972 ]. В лаборатории А. Цаголова ген а-КГД S. cerevisiae был клонирован, он содержал открытую считывающую рамку из 3042 пар оснований, способную кодировать белок из 1014 остатков аминокислот с Mr = 114.470 Да [ Repetto ea 1989 ]. Белок имел 38% остатков, идентичных с последовательностью а-КГД Е. coli . В последующей работе те же авторы изолировали и идентифицировали ген, кодирующий дигидролипоилсукцинилтрансферазу (КЕ2) из S. cerevisiae.
