NADH-дегидрогеназа экзогенного NADH
Дрожжевые митохондрии содержат три NADH-убихинонредуктазы . Две из них были рассмотрены. Третья, называемая дегидрогеназой экзогенного NADH, катализирует окисление экзогенного цитоплазматического NADH , локализована на внешней стороне внутренней митохондриальной мембраны , не чувствительна к действию ротенона, пиерицидина А [ Котельникова ea 1973 , Jagow ea 1970 ] и не содержит Fe-S центров . В литературе имеется несколько сообщений о выделении очищенных препаратов внешней NADH-дегидрогеназы из дрожжей [ Davis ea 1982 , Mackler ea 1980 ]. Препараты фермента выделены в лаборатории Маклера [ Davis ea 1982 , Mackler ea 1980 ] из S. cerevisiae и С. utilis, имели высокий молекулярный вес (1500,000), содержали FMN и состояли из одной (S. cerevisiae) или двух (С. utilis) субъединиц. Однако позже было показано, что фермент, выделенный из S. cerevisiae., был ничем иным как цитозольной синтетазой жирных кислот! Поскольку фермент из С. utilis имел сходные свойства и размеры, весьма вероятно, что и в этом случае авторы выделили синтетазу жирных кислот!
В другой работе [ Mackler ea 1981 ] очищенный препарат ротеноннечувствительной NADH-дегидрогеназы из клеток с С. utilis состоял из одного полипептида с м. м. 37 кДа и содержал в качестве простатической группы FAD; KM для NADH=16 мкм. В качестве акцепторов электронов он использовал Q, феррицианид и дихлорфенол индофенол, не окислял NADPH. К сожалению, осталось неясным, какой фермент был выделен авторами - внешняя или внутренняя NADH-дегидрогеназа? Фермент со сходными свойствами был выделен из S. cerevisiae [ De Vries ea 1988 ]. Он также состоял из одной субъединицы с м. м. 57 кДа; содержал одну молекулу FAD (# Еm7,6 - 370 мВ) на субъединицу, # KM для NADH=31 мкм; в качестве электронных акцепторов взаимодействовал с Q2, Q6 (природным хиноном S. cerevisiae), менадионом , дихлорфенолиндофенолом и феррицианидом . Однако при разрушении гена, кодирующего эту NADH-дегидрогеназу, митохондрии не были способны окислять матриксный, а не внешний NADH [ De Vries ea 1988 ]. Это доказывает, что авторами [ De Vries ea 1988 , Mackler ea 1981 ] были выделены препараты (фрагменты) внутренней NADH- дегидрогеназы. Внешняя NADH-дегидрогеназа дрожжей еще ждет своих исследователей.
