Альтернативный путь окисления: структура
Первые наблюдения [ Henry ea 1974 , Henry ea 1975 ] митохондриальной локализации цианидрезистентного пути в клетках дрожжей С. lipоlуtica получили многочисленные подтверждения. Показано, что альтернативная оксидаза локализована во внутренней митохондриальной мембране [ Betterton ea 1968 , Rigobello ea 1980 , Troostembergh ea 1976 , Vander ea 1979 ]. Одновременная локализация во внутренней митохондриальной мембране фосфорилирующей дыхательной цепи и цианидрезистентного окислительного пути поднимает вопрос об их взаимоотношениях и о молекулярной организации альтернативной оксидазы. В настоящее время существует общее мнение о том, что у подавляющего числа дрожжей и растений альтернативный путь ответвляется от основной дыхательной цепи на уровне коэнзима Q- цитохром b (см. рис. 15 ). Такой вывод основан на результатах ингибиторного анализа (окисление NAD-зависимых субстратов ингибируется ротеноном , но не чувствительно к действию антимицина А , т. е. альтернативная оксидаза акцептирует восстановительные эквиваленты от дыхательной цепи после места действия ротенона, но до места действия антимицина А; определения эффективности фосфорилирования при окислении различных субстратов (лишь окисление NAD-зависимых субстратов сопряжено с фосфорилированием, следовательно, ответвление альтернативного пути происходит до I пункта сопряжения ; определения стационарного уровня степени воcстановленности переносчиков при импульсе О2 в анаэробных условиях или импульсе субстрата в аэробных условиях. Более того, ингибирование двух окислительных путей при экстракции убихинона и на реактивации при встраивании KoQ позволили ряду авторов [ Drabikowska ea 1977 , Hannsens ea 1978 , Jagow ea 1975 , Lambowitz ea 1971 ] предположить, что KoQ является компонентом, общим для дыхательной цепи и альтернативной оксидазы. В качестве важного аргумента правильности такого предположения можно рассматривать и тот факт, что отделенная от дыхательной цепи цианидрезистентная оксидаза способна окислять различные хинолы [ Hug ea 1978 ]. Опыты по инактивации и реактивации, строго говоря, не исключают возможности ответвления альтернативной оксидазы от компонента дыхательной цепи, расположенного за KoQ и перед цитохромом Ь, т. е. от железосерного кластера Риске [ Crane ea 1977 ]. По данным [ Robinson ea 1990 ], альтернативная оксидаза представляет собой обращение стадии восстановления QH до QH2 в протон-движущем убихиноновом цикле Митчела [ Mitchell ea 1975 , Mitchell ea 1976 ].
