Изоцитратдегидрогеназа (ИЦД) NAD+-зависимая
NAD+-зависимая ИЦД локализована лишь в матриксе митохондрий, тогда как NADP+-зависимая - как в митохондриях, так и в цитозоле. В цикле Кребса участвует преимущественно NAD+ -зависимая ИЦД. Для дрожжей в высокоочищенном состоянии выделена и охарактеризована NAD+-зависимая ИЦД [ Barnes ea 1971 , Kuehn ea 1971 ]. Аллостерическим активатором NAD+- зависимой ИЦД у дрожжей, как и у NADP+-зависимой ИЦД бактерий, является AMP [ Barnes ea 1971 ], а для животных тканей - ADP [ Giorgio ea 1970 ]. AMP активирует NAD+-зависимую ИЦД дрожжей, понижая Км для изоцитрата, но не влияя на Vmax [ Gabriel ea 1990 ]. KM для изоцитрата 1,1 10 4 М Другим положительным модификатором NAD+-зависимая ИЦД является цитрат [ Barnes ea 1971 ].
Mr NAD+-зависимой ИЦД на основании седиментационного анализа равна 3 10 5 Да, а субъединицы при определении электрофорезом в ПААГ в присутствии DDS-Na имеют Mr=3,9-10 4 Да.
NAD+-зависимая ИЦД дрожжей, по-видимому, состоит из 2 идентичных субъединиц [ Barnes ea 1971 ]. Показано, что NAD+-зависимая ИЦД S. cerevisiae состоит из двух близких по молекулярной массе, но неидентичных субъединиц в 39.000 Да и 40.000 Да [ Keys ea 1990 ]. Субъединицы имеют разные N-концы и различаются иммунохимическими методами. Подобно другим олигомерным ферментам, NAD+-зависимая ИЦД обладает чувствительностью к холоду [ Palm ea 1972 ].
NAD+-зависимая ИЦД N. crassa Для гриба N. crassa NAD+-зависимая ИЦД очищена до гомогенного состояния. Она отличается от аналогичного энзима дрожжей тем, что состоит из равного числа неидентичных субъединиц с Mr=42.860 Да и 38.300 Да, всего молекула содержит 6 или 8 субъединиц [ Nelson ea 1979 ]. В этом отношении она сходна с NAD-зависимой ИЦД сердца, которая содержит несколько разных субъединиц [ Ramachandran ea 1980 ].
