Феррохелатаза (протогем-ферролиаза) дрожжей
Во внутренней митохондриальной мембране локализована феррохелатаза (протогем-ферролиаза, К.Ф. 4.99.1.1 ), катализирующая последнюю стадию биосинтеза гема - включение восстановленного двухвалентного железа Fe(II) в протопорфирин IX [ Camadro ea 1982 ]. Феррохелатаза из дрожжей S. cerevisiae сходна во многих отношениях с другими эукариотическими феррохелатазами [ Camadro ea 1982 ]. Фермент прочно связан с внутренней мембраной митохондрий. Высокоочищенный препарат из митохондрий дрожжей S. cerevisiae имеет молекулярную массу 40 кДа, ИЗТ=6,3, для проявления максимальной активности требует присутствия жирных кислот , имеет высокое сродство к протопорфирину IX (# Км = 9 10-6М) и активен как с Fe(II) (# Км =1,6 10 -7 М, так и с Zn (II) (# Км = 9 10 -6 М [ Camadro ea 1988 ]. Фермент кодируется ядерным геном (НЕМ15) , синтезируется на цитоплазматических рибосомах и транспортируется в митохондриях в виде предшественника, который превращается в зрелую форму белка после отщепления сигнальной последовательности [ Labbe-Bois ea 1990 ]. Ген дрожжей S. cerevisiae НЕМ 15 был клонирован и секвенирован [ Labbe-Bois ea 1990 ]. Рассчитанная по нуклеотидному составу гена первичная структура белка полностью согласуется с той, что была определена для очищенного фермента. Белок богат лизином (до 9%) и не содержит, кажется, трансмембранных фрагментов. Поскольку протопорфирин IX является продуктом ферментативного окисления протопорфириногена с участием молекулярного# О2 в качестве субстрата (реакция катализируется прочно связанной с внутренней митохондриальной мембраной протопорфириногеноксидазой ), то полагают, что регуляция активности феррохелатазы может осуществляться на уровне доставки субстратов ( Fe(II) , протопорфириногена , протопорфирина IX ), восстановления Fe(III) до Fe(II) или удаления гема - конечного продукта [ Camadro ea 1982 ].
