Модельные линии животных: алгоритм формирования
Алгоритм формирования генетической линии животных с мутациями в заданном гене предполагает:
наличие культур тотипотентных, т. е. способных к неограниченному развитию и дифференцировке, эмбриональных стволовых клеток ;
создание на базе рекомбинантных ДНК генно-инженерных конструкций для направленного переноса генов;
трансфекцию этих конструкций в культуры эмбриональных стволовых клеток с последующим скринингом и отбором клонов со специфическими генетическими модификациями;
введение отобранных модифицированных клеток в зародыш на стадии бластоцисты по методу Гарднера с целью получения химерных трансгенных животных;
отбор химерных особей, несущих модифицированные гены в различных тканях и органах;
селекцию особей, гетерозиготных по данной мутации;
инбредное разведение и селекцию гомозигот ( рис. 8.1 ).
