Модельные линии животных: общие сведения
Достижения экспериментальной эмбриологии млекопитающих и молекулярной генетики позволяют осуществлять направленное получение генетических моделей наследственных болезней путем введения сайт-специфических модификаций в геном млекопитающих. Такой значительный качественный прорыв в генетическом моделировании стал возможен благодаря появлению принципиально новой технологии манипулирования с ранними зародышами млекопитающих.
Особенно важными в этом отношении оказались два новых методических подхода: получение зародышей-химер, состоящих из клеточных клонов разных зигот, созданных путем введения тотипотентных клеток в полость бластоцисты [ Gardner R.L., 1978 ], и разработка технологии культивирования клеточных векторов так называемых эмбриональных стволовых клеток [ Evans M.G., Kaufman М., 1981 ].
С другой стороны, появились методы сайт-специфического переноса клонированных последовательностей ДНК в геном эукариот, основанные на отборе клеточных клонов, в которых после трансфекции происходит инсерция экзогенной ДНК в гомологичном сайте геномной ДНК без какого-либо нарушения последовательности ДНК в месте встраивания.
Конструированию генетических моделей должны предшествовать идентификация и сравнительный анализ двух гетерологичных генов: гена человека, вследствие нарушения работы которого развивается моделируемое заболевание, и его гомолога у выбранного для моделирования животного. При выборе объекта моделирования, в первую очередь, руководствуются методическими возможностями экспериментального манипулирования с животными. Важное значение имеет сходство кодирующих областей гетерологичных генов по нуклеотидным последовательностям.
В большинстве случаев мыши представляются наиболее удобным объектом для моделирования.
