Мeтоды идентификации нейронов и прослеживание их связей
Хотя техника Гольджи все еще широко используется, многие новые подходы облегчили функциональную идентификацию нейронов и синаптических связей. Молекулы, которые окрашивают нейрон полностью, могут быть инъецированы через микропипетку, которая одновременно регистрирует электрический сигнал. Флуоресцентные маркеры, такие как люцифер желтый , позволили увидеть самые тонкие отростки в живой клетке. Внутриклеточно могут быть введены такие маркеры, как фермент пероксидаза хрена (ПХ) или биоцитин ; после фиксации они образуют плотный продукт или ярко светятся в флуоресцентном свете. Нейроны можно окрасить пероксидазой хрена и при экстраклеточной аппликации фермент захватывается и транспортируется в тело клетки. Флуоресцентные карбоциановые красители при соприкосновении с мембраной нейрона растворяются и диффундируют по всей поверхности клетки. Эти приемы очень важны для прослеживания прохождения аксонов из одной части нервной системы в другую.
Для описания специфических нейронов , дендритов и синапсов путем избирательного маркирования внутриклеточных или мембранных компонентов используют антитела . На рис. 1.5 показана группа специфических биполярных клеток , маркированных антителом к ферменту фосфокиназа С . Антитела успешно применяются для прослеживания миграции и дифференциации нервных клеток в онтогенезе . Дополнительным подходом для описания нейронов является гибридизация in situ : специфически меченые зонды маркируют мРНК нейрона , которая кодирует синтез канала, peцептора, передатчика или структурного элемента.
