Открытое и закрытое состояния ацетилхолинового рецептора
На рис. 3.4 А представлена одна из альфа-субъединии закрытого АХР, в котором изогнутый М2 yчасток вдается в пору. Для того, чтобы получить изображение открытого AXР, Unwin апплицировал АХ в течение 5 мс перед быстрым замораживанием, захватывая, таким образом, рецепторы в открытом состоянии. Это достигалось быстрым нанесением АХ на AXР-содержащие везикулы , которые сразу после отого падали в жидкий азот.
Сравнение изображений, полученных без АХ и после действия этого медиатора, показывают, что связывание АХ вызывает вращательное движение спиралей во внеклеточных участках АХР, что передается, по-видимому, на M2 спирали. Каким бы ни был механизм, в М2 спиралях появляется вращательное движение, направленное на перемещение этих участков от центра ( рис. 3.4 В), что в конечном счете приводит к открытию ионного канала АХР.
Точная локализация воротного механизма пока не определена. На основании структурных данных можно предположить, что ворота расположены вблизи изгиба М2 спирали, возможно, соответствуя лейцину в позиции 251 (L251). Однако, эксперименты Karlin и коллег на мутантных каналах, экспрессированных в ооцитах, позволяют предположить, что ворота располагаются гораздо ближе к цитоплазматическому концу спирали. Эти авторы нашли, что добавленный во внеклеточный раствор водорастворимый блокирующий реагент MTSEA проходил закрытую пору до глубины, соответствующей треонину в позиции 244 (Т244). Если же MTSEA добавлялся с цитоплазмитической стороны, он практически не мог проникнуть в закрытый ионный канал АХР.
