Ядерные белки: импорт, NLS-зависимый механизм, общее представление
Как уже говорилось, NLS-содержащий белок связывается с уже сформированным гетеродимером импортинов-альфа/бета, после чего образовавшийся комплекс ассоциирует через импортин-бета с белками ядерной поры и транслоцируется в ядро. Здесь импортин-бета удаляется, связываясь с RanGTP : считается, что связывание импортином-бета RanGTP и IBB-содержащего белка одновременно невозможно из-за стерических препятствий. Импортин-бета, связавшийся с RanGTP быстро выводится в цитоплазму. Связывание RanGTP на этом этапе строго обязательно, но никакие дополнительные факторы для транслокации не нужны. Комплекс импортин-альфа/субстрат нестабилен и распадается высвобождая груз. Реэкспорт импортина-альфа осуществляется при посредстве белка CAS , обладающего способностью связывать RanGTP. В составе такого тройного комплекса импортин-альфа транслоцируется обратно в цитоплазму.
В цитоплазме комплекс RanGTP/CAS/импортин-альфа диссоциирует под действием белков RanGAP и RanBP1 , которые, переводя Ran в GDP-связанную форму, уменьшают его сродство к импортинам (для диссоциации комплекса импортин-альфа/CAS/RanGTP была показана достаточность RanBP1, гидролиз GTP для этого не требуется). Импортины высвобождаются в цитоплазму и цикл тем самым замыкается. Что касается комплекса RanGTP/импортин-бета, то для его диссоциации помимо RanGAP и RanBP1, необходим импортин-альфа или другой фактор, стабилизирующий Ran-свободную форму транспортина ( рис. 7. ) ( Floer, M. et. al. 1997 ).
Таким образом необратимость процесса импорта, по-видимому, достигается за счет быстрой диссоциации транслоцируещегося в ядро комплекса (импортин-альфа/бета/NLS), а необратимость реэкспорта импортинов - за счет эффективной диссоциации комплекса импортин(ы)/RanGTP.
Реимпорт рецептора CAS происходит, по-видимому, пассивно. Существуют свидетельства в пользу того, что еще некоторые импортины, а именно импортин-бета , транспортин и экспортин-t , в свободной форме способны пассивно проходить через ядерные поры ( Kose, S.,et.al.1997 ; Gorlich, D., and U. Kutay. 1999 ).
