Ген rB: трансфекция опухолевых клеток
Наиболее убедительные доказательства супрессирующего действия гена Rb были получены в экспериментах по трансфекции нормального гена Rb в опухолевые клетки. Так, введение кДНК нормального аллеля Rb в ретровирусном векторе в культуры клеток ретинобластомы и остеосаркомы, содержащие мутантные гены Rb, нормализовало клетки in vitro и подавляло опухолеобразование in vivo ( Huang H.-J., Yee J.K., ea, 1988 , Bookstein R., Shew J.-Y., ea, 1990 , Takahashi R., Hashimoto T., ea, 1991 ).
Нормализация злокачественных клеток под влиянием диффундирующих веществ, выделяемых в культуральную среду нормальными клетками, также подтверждает супрессорную активность гена Rb( Hollingsworth R.E., Lee W-H., 1991 ). Под влиянием гена супрессора клетка может ревертировать к норме по одному признаку, сохраняя другие признаки злокачественности . Например, при подавлении опухолеобразования клетками карциномы предстательной железы под влиянием нормального гена Rb, они сохраняли скорость роста in vitro характерную для трансформированных клеток ( Bookstein R., Shew J.-Y., ea, 1990 ).
