Антионкогены: история открытия
Впервые супрессия злокачественности была выявлена еще в 60-х г.г. методами генетики соматических клеток. При гибридизации злокачественных и нормальных клеток млекопитающих , доминировал нормальный фенотип ( Harris H., Miller O.J., ea, 1969 , Harris H. 1971 ). Это наблюдалось как при внутривидовых, так и при межвидовых комбинациях родительских клеток. Обычно использовали сочетание клеток человека и грызунов. Однако нормализация была отмечена только в тех случаях, когда гибридные клетки сохраняли практически полные наборы хромосом родительских форм ( Bregula U., Klein G., ea, 1971 , Klein G., Bregula U., ea, 1971 ). При гибридизации нормальных клеток человека со злокачественными клетками грызунов, очень быстро происходила элиминация хромосом человека. Одновременно наблюдалось выщепление клонов, проявляющих в большей или меньшей степени признаки злокачественности ( Bregula U., Klein G., ea, 1971 , Klein G., Bregula U., ea, 1971 ), т.е. потеря хромосом нормальной родительской формы устраняла супрессию признаков злокачественного фенотипа.
Быстрая элиминация хромосом человека затрудняла идентификацию хромосом, которые возможно ответственны за супрессию. Это затруднение было преодолено путем использования внутривидовых гибридов, причем особый интерес представляют гибриды между клетками человека ( Stanbridge E.J., 1976 , Stanbridge E.J., Der Ch.J., ea, 1982 ). Было установлено, что приобретение злокачественности связано с потерей не любых, а определенных хромосом нормальных родительских клеток, причем супрессия определялась не потерей какой то одной, но достаточно большого числа разных хромосом человека ( Kaelbling M., Klinger H.P., 1986 , Klinger H.P.,1982 , Klinger H.P., Kaebling M., 1986 , Stanbridge E.J., Flandermeyer R.R., ea, 1981 ).
Поскольку процесс элиминации хромосом у внутривидовых гибридов процесс достаточно длительный, был разработан метод ускоряющий идентификацию хромосом ответстсвенных, за супрессию. Для этого были использованы так называемые микроклетки , содержащие одну, или небольшое число хромосом нормальной родительской формы ( Фурнье Р., 1985 ). Гибридизация злокачественных линий с микроклетками показала, что введение нормальных хромосом 1,4,6 и 11человека приводило к появлению признаков нормального фенотипа ( Kugoh H.M., Hashiba H.,ea, 1990 , Ning Y., Weber J.L., ea, 1991 , Sugowara O., Oshimura M., ea, 1990 , Trent J.M., Stanbridge E.J., ea, 1990 ). Позднее были выявлено, что хромосомы 3,5,9,13,22 также ответственны за супрессию ( Knudson A.G., 1993 ).
Участие в супрессии многих хромосом, очевидно содержащих гены супрессоры, позволяло предположить, что эти гены, подобно клеточным онкогенам, могут обладать разной спецификой действия. В таком случае, при гибридизации между собой злокачественных клеток, несущих разные гены супрессоры, будет происходить комплементация и гибридные клетки будут ревертировать к норме по тем, или иным признакам.
Явление комплементации действительно наблюдалось в ряде случаев. Так, при некоторых сочетаниях между иммортализованными клетками человека (всего 21 линия), гибридные клоны характеризовались ограниченным сроком жизни. При этом выявлены 4 группы комплементации ( Pereira-Smith O., Smith J., 1988 ). Та или иная степень комплементации была отмечена и другими авторами при гибридизации злокачественных клеточных линий человека и грызунов.( Clements G.B., Fenyo E.M., ea, 1976 , Marshall C.J., Dave H., 1978 , Stanbridge E.J., Der Ch.J., ea, 1982 ).
Результаты проведенных исследований позволяют сделать ряд принципиальных выводов. Они показывают, что злокачественная трансформация возникает не только в результате различных генетических событий, превращающих протоонкогены в онкогены, но и при потере генетической информации, генов, присутствующих в хромосомах нормальной клетки, которые налагают запрет на развитие злокачественности. Нормальные аллели этих генов препятствуют появлению трансформированного фенотипа, т.е. они представляют собой гены супрессоры, обладающие доминантным эффектом.
