Опухолевая гетерогенность пpи pаке гpуди: данные по гибридизации in situ
В ограниченном числе исследований гибридизация in situ используется для изучения множественных и/или структурных хромосомных изменений в интерфазных ядрах клеток из первичных раковых опухолей с использованием центромерноспецифичных зондов ДНК [ Devilee P., Van Vliet M., ea, 1991 , Devilee P., Thierry R.F., ea, 1988 , Dingra K., Sahin A., ea, 1992 ].
Этот метод идентифицирует хромосомные участки - мишени для зондов ДНК, которые затем могут быть выявлены и оценены и подсчитаны с использованием флуоресцентных или ферментативных иммунноцитохимических процедур [ Raap A.K., Cornelisse C.J.,1992 ]. Во всех этих исследованиях наблюдалась гетерогенность в числе копий центромерных сигналов различных хромосом, даже если ДНК проточная цитометрия показала присутствие только единичного анеуплоидного 40,1 пика [ Devilee P., Thierry R.F., ea, 1988 ].
Когда используются толко центромерные зонды очевидно,что нельзя сделать заключение о размере затрагиваемого хромосомного района. Однако, использование комбинаций как центромерных, так и региональных зондов может дать подобную информацию. В одном из исследований [ Matsumura K., Kallioniemi A., ea, 1992 ] было проанализировано 19 первичных карцином груди как с центромерным зондом хромосомы 17 , так и с космидным зондом для 17p13.1. Дополнительно к гетерогенности центромерного числа копий авторы также обнаружили различия в космидном числе копий даже между клетками с одинаковым числом центромерных копий.
Сравнение с данными LOH из тех же опухолей показало, что физические делеции являются доминантным механизмом аллельной потери. Хотя техническме факторы, такие как различия в гибридизационной эффективности гибридизации могут иметь значение для описанных вариаций , тем не менее исследования гибридизации in situ делают достаточно ясным существование опухолевой гетерогенности в форме существования гетерогенных районов или даже целых плечей хромосом.
