Сплайсинг: лариат-расплетающий фермент
Экстракты, приготовленные из клеток HeLa ( Ruskin, 1985 ) и дрожжей (N.Shneider, неопубликованные результаты) содержат ферментативную активность, которая специфически гидролизует 2'-5' фосфодиэфирную связь депротеинизированного лариата РНК и продуцируют линейную форму РНК, содержащую 5'-концевой монофосфат. Эта реакция названа "лариат-расплетающей" (lariat debranching) ( Ruskin, 1985 ). Функция этого фермента in vivo неизвестна, но вероятно он учавствует в деградации интрона. В соответствии с этим, линейная форма интрона, полученная при разрезании 2'-5' фосфодиэфирной связи, выявлена in vivo как для дрожжей ( Domdey H. 1984 ), так и для млекопитающих ( Zeitlin S., 1984 ). Другие ферменты, возможно включеные в процесс деградации интронов, включают 3' экзонуклеазу, которая разрывает линейный 3' конец вырезаемого интрона ( Kramer,1985 , Ruskin,1985 ). Вырезанные интроны с укороченными 3' хвостами обнаружены in vivo как у дрожжей ( Domney, 1984 , Rodriguez J.R. 1984), так и в клетках млекопитающих ( Zeitlin S.,1984 ).
Другая возможность заключается в том, что лариат расплетающий фермент сам является ферментом, включенным в сплайсинг. Формирование лариата включает в себя реакцию разрыва 2'-5' связи. Этот разрыв использует 3' гидроксильную группу первого экзона как акцептор и регенерирует линейный транскрипт. В отсутствие 3' гидроксильной группы фермент может катализировать реакцию фосфорилирования, в конечном счете приводя к линеаризации лариата.
