Амплификация РНК с помощью реверсионной транскриптазы ПЦР (РТ-ПЦР)
РТ-ПЦР используется для амплификации образцов РНК, например таких, которые взяты у вируса бешенства собак . Эта РНК в первую очередь должна быть превращена в копию к-ДНК с помощью фермента, названного реверсионной транскриптазой . Данная методика используется главным образом для размножения вирусных РНК - например, вируса чумы собак или вируса инфекционного перитонита кошек (ИПК) . ИПК вызывается кишечным коронавирусом , который может провоцировать и общую неклиническую инфекцию. В настоящее время не существует способов провести различие между патогенными и непатогенными штаммами этого вируса. Раньше высказывались предположения, что ПЦР сможет дать надежный тест для выявления ИПК, но они, к сожалению, не оправдались. Первый цикл РТ-ПЦР для выявления кишечного коронавируса кошек часто следует за гнездной реакцией, которая может легко определить наличие микроорганизма. Данная проблема, аналогичная проблеме серологического тестирования, состоит в том, что ПЦР не способна отделить вирус, вызывающий ИПК, от непатогенного кишечного коронавируса. Крайняя чувствительность ПЦР также приводит к тому, что этот метод легко определяет вездесущий коронавирус; таким образом, это очень малоперспективный тест с точки зрения диагностики и прогнозирования. Поэтому результаты ПЦР не могут быть использованы в качестве единственного подтверждения необходимости эвтаназии для кошек, предположительно зараженных ИПК.
РТ-ПЦР также используется для определения того, создает ли микроорганизм и-РНК в качестве шаблона для синтеза новых белков. Этот тест может быть предложен для различения микроорганизма, находящегося в тканях в латентном состоянии, от того, который является источником заболевания.
