Молекулярные методы диагностики новообразований: общие сведения
Молекулярная онкология позволила увеличить количество данных о генетических изменениях, которые часто связываются с конкретными видами опухолей. Указанные исследования строятся на демонстрации молекулярных изменений на нуклеотидном уровне, которые имеют место в опухолевых клетках. Эти методы состоят в изоляции ДНК , РНК и протеинов из опухолевых клеток и анализе их составляющих на наличие нарушений, связанных с присутствием, отсутствием или увеличением специфического гена или его продуктов и других изменений, таких как хромосомная транслокация .
Одним из важных соображений при использовании молекулярных методов обнаружения или характеристики опухолевых клеток является их нижняя граница обнаружения в составных частях тканей больного или в реакции на данную опухоль в виде воспаления или уплотнения. Это может представлять важность для клинического ветеринара по мере применения новых технологий к пробам, собранным с участков, предварительно подвергшихся лечению от рака или участков возможных метастаз, например, лимфатических узлов, то есть для обнаружения минимального остаточного заболевания и/или метастаз. В ходе сравнительных исследований реверсионная транскриптаза полимеразной цепной реакции (РТ-ПЦР) оказалась более чувствительной, чем иммуногистохимические методы , хотя в других исследованиях при использовании строго иммуногистохимических или иммунофлюоресцентных методов были получены сравнительные результаты. Например, при использовании антицитокератинных антител в иммуногистохимических анализах понижение границы обнаружения соответствующих опухолевых клеток в модельных системах составляло от 1/10000 до 1/1000000 (обнаруженных опухолевых клеток/гемопоэтических клеток с ядрами). При использовании РТ-ПЦР для обнаружения специфического антигена в опухолевых клетках предстательной железы или тирозина гидроксилазы mRNA в клетках меланомы или нейробластомы нижняя граница обнаружения находилась в диапазоне 1/1000000-1/10000000.
