Перекрестная проба для переливания крови
Перекрестные пробы выявляют наличие естественным образом возникающих изоантител или антител, образующихся в результате реакции на предшествующее несовместимое переливание крови. Взятие перекрестных проб не предотвращает сенсибилизации пациента к будущим переливаниям крови. Даже при наличии конкретного донора, кровь которого совместима по перекрестным пробам, если прошло по крайней мере 5 дней после первого переливания, перед введением новых препаратов крови нужно снова взять перекрестную пробу, особенно в случае использования в качестве донорской той же самой крови.
Взятие перекрестных проб является простым методом, который может быть выполнен с помощью стандартного лабораторного оборудования. Нужно выполнить главные, второстепенные и аутоконтрольные перекрестные пробы, хотя второстепенные перекрестные пробы редко применяются у собак. Главная перекрестная проба всегда должна быть совместимой при комнатной температуре и при 37*С. Ниже приведен протокол простой главной перекрестной пробы (донорских эритроцитов и сыворотки крови или плазмы пациента):
1. Центрифугируйте донорскую кровь с EDTA (этилен- диаминтетрауксусной кислотой) или цитратом при минимальной возможной скорости центрифуги в течение примерно 10 минут.
2. Возьмите 0,2 мл эритроцитарной массы и добавьте 4,8 мл обычного физиологического раствора (0,9%). Перемешайте. (Теперь в пробирке 5,0 мл; данная процедура существенно заменяет стадию промывания.)
3. Поместите по ОД мл данной смеси в три небольшие тест-пробирки.
4. Поместите по 0,1 мл сыворотки или плазмы крови пациента в каждую из трех вышеуказанных пробирок. В каждой пробирке теперь 0,1 мл смеси донорских эритроцитов и физиологического раствора и 0,1 мл сыворотки или плазмы крови пациента, всего 0,2 мл в каждой.
5. Выдержите (в течение 15 минут) одну пробирку при 37*С, другую при комнатной температуре (25*С) и третью в холодильнике при температуре 4*С.
6. Центрифугируйте их (с максимальной скоростью) в течение 1 минуты.
7. Проверьте надосадочную жидкость на наличие гемолиза. Любой гемолиз показывает несовместимость перекрестной пробы.
8. Проверьте содержимое пробирки. Слегка взболтайте содержимое. Жидкость в пробирке должна приобрести красный цвет по мере рассеивания эритроцитов. При агглютинации или микроагглютинации наблюдается несовместимость перекрестных проб (проверьте каплю крови под микроскопом слабой мощности).
9. Для завершения менее значительных перекрестных проб воспользуйтесь эритроцитами пациента и донорской сывороткой или плазмой. Для завершения аутоконтроля используйте эритроциты и плазму пациента. У собак взятие незначительной пробы полезно для пациента тем, что он при переливании получает многочисленные препараты плазмы крови.
