Клонирование по комплементации

Гены, мутации в которых приводят к ауксотрофности, температурочувствительности, морфологическим и физиологическим изменениям, клонируют по восстановлению дикого фенотипа у трансформантов. Самые первые клонированные гены были выявлены по способности подавлять проявление мутаций ауксотрофности у кишечной палочки ( Struhl et al., 1976 ; Ratzkin, Carbon, 1977 ; Struhl, Davis, 1977 ; Bach et al., 1979 ). После разработки челночных векторов стало возможно клонирование по комплементации в дрожжах. Примером может служить выделение гена MATalfa по восстановлению способности к копуляции у стерильных мутантов matalfa. Трансформанты, отобранные по фенотипу Leu+ ( маркер вектора ), проверяли на способность к копуляции методом отпечатков ( Hicks et al., 1979a ; Nasmyth, Tatchell, 1980 ).

Ссылки: