Олигонуклеотид-направленный мутагенез
Чаще всего используют методику олигонуклеотид-направленного мутагенеза. При этом необходимо знать нуклеотидную последовательность того участка, который предполагается изменить. Синтетические олигонуклеотиды с заменами или небольшими делециями используют в качестве праймера при синтезе на однитевой матрице. Двуцепочечный гетеродуплекс затем вводят в клетки E.coli. При репликации образуются последовательности дикого типа, или мутантные. Мутантные молекулы выявляют при гибридизации с олигонуклеотидом-праймером, или проводят обогащение мутантными молекулами ( Kunkel, 1985 ).
