Полуселективный метод отбора

При применении полуселективных методов из рассева мутагенезированных клеток вырастают колонии и мутантные, и дикого типа, но мутанты можно отличить по изменению морфологии и окраски колоний. На чашке анализируют до 800 - 1000 колоний, и в одном эксперименте исследуют значительно большую выборку, нежели при использовании неселективных методов отбора . Так получают мутанты с потребностью в аденине (ade1, ade2) или аспартате (asp5), накапливающие красный пигмент, морфологические мутанты (rgh, rpm), мутанты с дыхательной недостаточностью (rho, pet) и т.д.

Возможен также прямой отбор мутантов по активности и регуляции синтеза некоторых экзоферментов, локализованных на клеточной стенке или выбрасываемых в культуральную среду. При этом используют гистохимические методы , индикаторные среды ( Guarente,Ptashne, 1981 ; Johnston, 1977 ).

Ссылки: