Промоторы термошоковых генов
Сначала в промоторах генов термошока дрожжей был обнаружен элемент HSE, необходимый для экспрессии при термошоке. Он был выявлен по гомологии нуклеотидной последовательности с контролирующим элементом термошоковых генов высших эукариот ( Tuite et al., 1988 ; Slater, Craig, 1987 ). Дальнейшее изучение транскрипции генов термошока связано в основном с генами группы SSA . Для этих генов выведена обобщенная последовательность элемента, но в настоящее время предполагается, что основную функцию выполняет не она, а короткие повторы ТТС со строго упорядоченным расположением ( Boorstein, Craig, 1990b ). Показано, что для индукции транскрипции достаточно одного такого элемента, хотя обычно в промоторах термошоковых генов их несколько ( Slater, Craig, 1987 ).
С элементом HSE взаимодействует транскрипционный активатор, причем в отличие от аналогичного активатора дрозофилы он постоянно связан с промотором ( Jacobsen, Pelham, 1988 ; Sorger, Pelham, 1988 ). Регуляция функции транскрипционного активатора, названного HSF1p , осуществляется путем фосфорилирования ( Slater, Craig, 1987 ; Sorger, Pelham, 1988 ).
Ген для этого белка HSF1 был клонирован и секвенирован ( Wiederrecht et al., 1988 ). Все типы регуляции транскрипции генов SSA осуществляются с участием этого активатора. Дизрупция гена HSF1 приводит к летальности.
Базальный уровень экспрессии термошоковых генов также зависит от элемента HSE (следовательно, от активности белка HSF1p): делеция или мутация в одном из элементов HSE (HSE2) приводят к снижению базального уровня транскрипции конститутивного гена SSA1 . C элементом HSE2 прекрывается сайт негативной регуляции ( Sumrada, Cooper, 1987 ). Таким образом, базальная экспрессия находится под негативным и позитивным контролем ( Park, Craig, 1989 ).
В контроле авторегуляции экспрессии термошоковых генов участвуют элементы HSE ( Boorstein, Craig, 1990c ) и SRS1 - дополнительный элемент, не перекрывающийся с сайтом негативной регуляции ( Stone, Craig, 1990 ).
Активация гена SSA3 при индукции голоданием осуществляется дополнительным элементом: UASPDS ( Boorstein, Craig, 1990a ). Таким образом, в промоторах генов SSA могут находиться по крайней мере две UAS- (HSE2 (UASHS) и UASPDS ) и две URS-последовательности.
