Измерение стабильности транскриптов in vivo
Клетки выращивали как описано выше. После четырех часов роста добавляли рифампицин до конечной концентрации 100 мкг/мл и продолжали инкубацию в клеточной качалке. По прошествии 2, 5, 10 и 20 мин, а также перед добавлением антибиотика, отбирали аликвоты клеточной культуры по 500 мкл. Образцы немедленно смешивали со 100 мкл стоп-буфера (95% спирт, 5% фенол) и замораживали в жидком азоте. После оттаивания на льду, образцы центрифугировали при 5000 g в течение 5 мин и далее выделяли РНК как описано выше.
