Трансформация компетентных клеток E. coli (50 мкл)
50 мкл замороженной суспензии клеток E.coli размораживали на льду 10 минут. Добавляли ДНК (5 мкл лигазной смеси или 10-15 нг плазмидной ДНК, соответственно). Инкубировали на льду 20 минут для сорбции плазмидной ДНК. Затем выдерживали клетки при 42*С в течение 1 мин 20 сек (heat shock) и сразу охлаждали во льду в течение 1-2 мин. Добавляли подогретую (37*C) жидкую среду SOС (SOB с добавлением 0.4% глюкозы) до 1 мл и инкубировали при легком покачивании при 37*С 60 мин. На чашки Петри с агаризованной средой LB, содержащей соответствующий антибиотик (карбенициллин либо ампициллин 100 мкг/мл, хлорамфеникол 34 мкг/мл), засевали по 100 мкл суспензии. Чашки Петри помещали в термостат на 37*С на ночь.
