Наследственные болезни: метод выявления мутаций по расщеплению ДНК
Химическое (или ферментативное) расщепление ДНК в местах неправильной сшивки оснований выявляет большую группу мутаций, ведущих к нестабильности ДНК. Мутации в молекуле ДНК могут изменять электрофоретическую подвижность фрагмента ДНК.
Во-первых, могут изменяться температурные показатели плавления двухцепочечных фрагментов, что можноопределить с помощью электрофореза двухчепочечной ДНК в градиентном денатурирующем геле (так называемый денатурирующий гель-электрофорез).
Во-вторых, в результате мутации изменяться конформация одночепочечных фрагментов, что выявляется путем электрофореза предварительно денатурирующих ДНК в неденатурирующих условиях. В-третьих, проводиться так называемый гетеродуплексный анализ, с помощью которого обнаруживаются нарушения линейности гетеродуплексов в местах коротких вставок и делеций. Суть этого варианта электрофорез двухчепочечной ДНК в нейтральном или равномерно денатурирующем геле.
