Простагландин-H2 D-изомераза: введение
Простагландин-H2 D-изомераза является представителем большого семейства белков, липокалинов , функционирующих в качестве переносчиков небольших липофильных молекул. Наиболее известными белками этой группы являются бета-лактоглобулин , альфа2-глобулин мочи , альфа1-микроглобулин , белок 14 плаценты . При этом простагландин-H2 D-изомераза является единственным известным липокалином, обладающим ферментативной активностью.
Простагландин-H2 D-изомераза ( простагландин D синтаза ; [(5Z,13E)- (15S)-9aльфа,11aльфа-эпидиокси-15-гидроксипростa-5,13-диеновая кислота D- изомераза, EC 5.3.99.2 ]) из мозга крысы ( Urade, 1985 ) и селезенки крысы ( Christ-Hazelhof, 1979 ; Urade, 1987a ) были очищены до гомогенного состояния и охарактеризованы. Они представляют собой два структурно, иммунохимически и кинетически различающихся фермента ( Urade, 1987a ). PGH- PGD изомераза, выделенная из селезенки крысы, обладает также глутатион-S- трансферазной активностью. Кроме того, для проявления изомеразной активности этим ферментом необходимо наличие в среде инкубации восстановленного глутатиона ( GSH ), тогда как в случае фермента, выделенного из мозга ( Urade, 1985 ), для перевода фермента в активированное состояние наряду с GSH могут быть использованы и другие SH-реагенты (дитиотреитол, бета-меркаптоэтанол, цистеин и цистеамин). С учетом этого свойства в литературе часто используются термины GSH-зависимая PGD синтаза (обнаруженная в мозге) и GSH-независимая PGD синтаза (обнаруженная в селезенке) для обозначения двух типов ферментов. В случае GSH-зависимого фермента было показано ( Urade, 1987a ), что в ходе реакции не происходит расходования GSH. Иммуногистохимические исследования, проведенные с использованием поликлональных и двух моноклональных антител к PGD синтазе из мозга ( Urade, 1987b ), а также гибридизации мРНК для этого фермента in situ и определения его активности ( Urade, 1993 ) позволили обнаружить места локализации этого фермента: нейроны , мягкая паутинная оболочка мозга , олигодендроциты , ганглиальные клетки сетчатки и волоски внутреннего уха . Показано также ( Hoffmann, 1993 ), что выделенный из спинномозговой жидкости человека b-trace белок идентичен GSH-независимой простагландин-H2 D- изомеразе мозга крысы. GSH-зависимая PGD синтаза имела другой характер распределения в тканях ( Urade, 1990 ). Она была обнаружена в цитозоле тканевых тучных клеток , выделенных из тимуса, тонкого кишечника, желудка и кожи зрелых крыс ( Urade, 1990 ), а также в некоторых глиальных клетках мозга цыпленка.
Еще один тип простагландин-H2 D-изомеразы, GSH- и тиол-независимой , представляет собой фермент, выделенный Shimizu ( Shimizu, 1979 ) из мозга крысы. По своим свойствам (молекулярный вес, pH оптимум, pI, зависимость каталитической активности от наличия в среде SH-реагентов, стабильность, инактивация фермента в ходе реакции) этот фермент значительно отличается от GSH-независимой простагландин-H2 D-изомеразы , выделенной позже Urade ( Urade, 1985 ). Удивительно, что в литературе отсутствуют какие-либо более поздние результаты исследования этого фермента за исключением сообщения Gerritsen ( Gerritsen, 1981 ) о выделении тиол-независимого фермента из цитозольной фракции микрососудов (7-80мкм) мозга крысы с каталитическими свойствами фермента, охарактеризованного Shimizu ( Shimizu, 1979 ).
