Рис. 4.1(epig). Сайленсинг и TPE у дрожжей
(а) Ген Ura3, встроенный рядом с простыми TG-богатыми теломерными повторами в левом плече хромосомы VII, подвергается сайленсингу теломерным гетерохроматином в данном штамме дрожжей. При выращивании на обычной богатой среде (YPD) не наблюдается различий между клетками дикого типа (wt), клетками с репрессированным субтеломерным геном Ura3 и мутантами по сайленсингу, у которых теломерный гетерохроматин утрачен, а ген Ura3 экспрессируется. На среде, содержащей 5-FOA (нижняя панель), с другой стороны, клетки с репрессированным геном ИrаЗ (например, клетки дикого типа) могут расти, а клетки, экспрессирующие его (sir2nyku 70 мутанты), не могут. Это объясняется тем, что продукт гена Ura3 превращает 5-FOA в токсичный интермедиат 5-фторурацил. Тест с серийными разведениями позволяет детектировать события сайленсинга даже при частоте 1 на (10 в степени 6) клеток.
(б) Клетки, содержащие ген Ade2 дикого типа, дают "белую" колонию, а клетки с мутантным ade2 - красную, что связано с накоплением красного интермедиата биосинтеза аденина. При встраивании гена Ade2 рядом с теломерой в правом плече V хромосомы происходит его эпигенетический сайленсинг. И "молчащее", и активное состояния гена Ade2 наследуются в генетически идентичных клетках, в результате чего образуются колонии с белыми и красными секторами (весьма похоже на картину, наблюдаемую при PEV).
