Сайленсинг генов у инфузорий, индуцируемый трансгенами
Макронуклеус Paramecium легко трансформировать с помощью микроинъекций, потому что любой введенный в него фрагмент ДНК может поддерживаться в широком диапазоне числа копий, реплицируясь автономно без потребности в каком-либо специфическом ориджине. Трансформация высококопийными, неэкспрессибельными трансгенами может переключить посттранскрипционный сайленсинг эндогенных генов, обладающих достаточным сходством по последовательности ( Ruiz et al., 1998 ; Galvani and Sperling, 2001 ). Сайленсинг не наблюдается, если в трансгене присутствует 3'UTR гена ( Galvani and Sperling, 2001 ), что заставляет предполагать, что регуляторные сигналы, присутствующие в РНК, влияют на способность конструкта индуцировать сайленсинг. Впоследствии оказалось, что сайленсинг коррелирует с накоплением гомологичных коротких РНК длиной приблизительно 23 нуклеотида (н) ( Gamier et al., 2004 ); это указывает на связь с путем RNAi . Эти короткие РНК длиной приблизительно 23 н, по-видимому, ответственны за прицельную деградацию гомологичных mRNAs и могут быть поэтому названы siRNAs (short interfering RNAs - короткие интерферирующие РНК). Сходный класс РНК длиной 23-24 н был также идентифицирован в вегетативных клетках Tetrahymena , и хотя какие-либо данные об их возможной роли отсутствуют, вполне вероятно, что они представляют собой эндогенные siRNAs ( Lee and Collins, 2006 ).
