Питательные среды

Аликвоты концентрированной талой воды (100 мкл) высевали на агаризованную питательную среду. Использовали два типа сред - R2A (дрожжевой экстракт - 0,05%, пептон - 0,05%, казаминовые кислоты - 0,05%, глюкоза - 0,05%, растворимый крахмал - 0,05%, K2HPO4 - 0,03%, MgSO4x7H2O - 0,05%, пируват натрия - 0,03%) и LB (бактотриптон - 1%, дрожжевой экстракт - 0,5%, NaCl - 1%). Для получения твердых сред добавляли 1,5% агара. Чашки Петри инкубировали при трех температурах - +4*С, +18*С и +37*С. Перед высевом на +4*С и +18*С, чашки охлаждали в холодильнике.

Для приготовления компетентных клеток использовали среду SOB: 2% бактотриптон, 0,5% дрожжевой экстракт, 10 мМ NaCl, 2,5 мМ KCl, после стерилизации среды автоклавированием добавляли 10 мМ MgSO4. Для приготовления питательной среды SOC использовали среду SOB с добавлением стерильного раствора глюкозы до конечной концентрации 20 мМ.

Ссылки: